【BUNSEN本生】ELISA試劑盒的原理及儲(chǔ)存方法?

　　ELISA試劑盒為捕獲抗體具有高親和力、高特異性、低內(nèi)毒素的單抗，研究者以刺激劑激活細(xì)胞時(shí)，不會(huì)影響活化細(xì)胞分泌細(xì)胞因子。ELISA試劑盒的原理是什么?

　　到目前為止，ELISA法仍在研究當(dāng)中占有著主流地位，普遍應(yīng)用使得實(shí)驗(yàn)更加方便、經(jīng)濟(jì)和準(zhǔn)確， ELISPOT技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)也決定了它的發(fā)展?jié)摿?。LISPOT法來(lái)源于ELISA，相比較傳統(tǒng)的ELISA法有所突破，是定量ELISA技術(shù)的延伸和發(fā)展。由于游離的循環(huán)抗體或CK的半哀期不同，使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官結(jié)合，傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)不能確切的反映體內(nèi)的抗體及CK的水平。

　　ELISA試劑盒的原理包括了可以提了兩款改良型siRNA用于活體轉(zhuǎn)染?？梢栽黾觭iRNA-轉(zhuǎn)運(yùn)試劑復(fù)合體的穩(wěn)定性。而SIRNAPLUS則不需要轉(zhuǎn)運(yùn)試劑，其轉(zhuǎn)運(yùn)載體就整合在siRNA分子上。為了解決這一問(wèn)題，公司開(kāi)發(fā)了一個(gè)試劑盒，可以將shRNA插入到基因組的特定位置。這一靶向整合試劑盒采用鋅指核酸酶技術(shù)，將 shRNAELISA試劑盒插入到人類基因組的AAVS1位點(diǎn)。這一技術(shù)將shRNA定位在一個(gè)地方，使影響shRNA表達(dá)水平的一個(gè)重要變量固定下來(lái)。

　　ELISA試劑盒普遍用作非放射性同位素的成鍵化驗(yàn)。在這種方法中，通常標(biāo)準(zhǔn)配體是固定的，通過(guò)加入溶液相受體或蛋白質(zhì)來(lái)使之成鍵。通過(guò)加入與受體特異性反應(yīng)的抗體來(lái)定量成鍵的受體，而且一開(kāi)始抗體的量以加入第二種能顯色的抗體測(cè)量。第二種抗體能識(shí)別抗體的末端，在其末端的堿性磷酸酯或過(guò)氧化物酶等與酶發(fā)生反應(yīng)，從而使溶液顯色。

　　ELISA試劑盒：準(zhǔn)備與貯存

　　ELISA試劑盒收到后立即貯存于2-8℃下，效期見(jiàn)試劑盒標(biāo)簽;所有成分在2-8℃下可保存至有效期。使用前，所有試劑平衡至室溫，不同批次的試劑不能交換使用。

　　1. 包被板，96孔，包被了抗人胎球蛋白A抗體;微孔板固定于板架上，密封于含有干燥劑的鋁箔密封袋內(nèi);貯存于2-8℃至有效期。

　　2. 胎球蛋白A示蹤抗體，1瓶，0.6 ml，濃縮，HRP標(biāo)記的抗人胎球蛋白A示蹤抗體溶于穩(wěn)定的蛋白基質(zhì)中;此試劑使用前需用示蹤劑抗體稀釋液進(jìn)行稀釋;貯存于2-8℃至有效期。

　　3. 示蹤抗體稀釋液，1瓶，11ml，即用，Trizma鹽酸溶于緩沖液;根據(jù)實(shí)驗(yàn)步驟用于示蹤抗體稀釋;貯存于2-8℃至有效期。

　　4. 試驗(yàn)緩沖液，濃縮，1瓶，11ml，含牛血清白蛋白的磷酸緩沖鹽;建議使用前以1:10比例用雙蒸水稀釋(如11 ml濃縮+99 ml的雙蒸水);貯存于2-8℃至有效期。

　　5. 洗滌液，濃縮，1瓶，20ml，30倍濃縮;試驗(yàn)前需用580ml的雙蒸水稀釋，混勻;一旦稀釋，不含疊氮化物防腐劑的磷酸緩沖鹽洗滌液會(huì)含表面活性劑;稀釋的洗滌液在室溫下可保存至效期。

　　6. HRP底物液;1瓶，12ml，含過(guò)氧化氫的TMB底物液;貯存于2-8℃至有效期。

　　7. 終止液，1瓶，12ml，0.5M硫酸，貯存于2-8℃至有效期。

　　8. 胎球蛋白A標(biāo)準(zhǔn)品，5瓶，含胎球蛋白A，不含疊氮化物防腐劑的液態(tài)牛血清基質(zhì);各標(biāo)準(zhǔn)品濃度見(jiàn)瓶子標(biāo)簽;3次凍存周期使用后，所有標(biāo)準(zhǔn)品保存至-20℃或更低。

　　9. 胎球蛋白A質(zhì)控，2瓶，含人胎球蛋白A，不含疊氮化物防腐劑的液態(tài)牛血清基質(zhì)，各質(zhì)控的精確濃度范圍見(jiàn)瓶子標(biāo)簽，3次凍存周期使用后質(zhì)控保存至-20℃或更低。

　　保存——如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

　　ELISA試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。